液体活检（Liquid Biopsy）技能的个人详解

  ctDNA的发现还要早于cffDNA，早在1947年，比DNA双螺旋结构发现还早6年的时分，Mandel和Metais就发现血浆中存在游离的核酸分子

  首要，我先向咱们引进“液体活检”这个名词，对这个名词的呈现也便是最近几年，在临床上关于一般的肿瘤是进行手术活检和穿刺活检，医师需要对患者肿瘤进行切片，这是一种有创的检测，关于操作和取样要求极高，因而，“液体活检”应运而生，它操作简略快捷，且能重复取样，也是MIT科技总述（MIT Technology Review）杂志发布的2015年度十大打破技能之一。

  “液体活检”（Liquid Biopsy）或称“液态活检”，关于实体肿瘤的前期确诊、用药监控、预后判别等的重要性现已日趋明亮。癌症病人血液中会存在少数游离的循环肿瘤细胞（CirculatingTumor Cell，CTC）且坏死的癌细胞亦会开释少数的循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）到血液中，因而可经过查验测验从肿瘤原发或搬运部位开释到血液中的CTC和ctDNA来检测癌症。

  现在“液体活检”依照检测样品分类，首要有两大方向：循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTCs）和循环肿瘤核酸（circulating tumor DNA, ctDNA）。CTC在上一期我现已跟咱们详细介绍了，那么为什么称CTC为“液体活检”呢？由于CTCs是由肿瘤原发灶和搬运灶的细胞构成的，跟着对肿瘤发展中的生物学改变的了解，经过外周血检测CTCs可以实时、动态的完成癌症的辅佐确诊、医治监测、复发搬运监测、预后判别，因而CTC可当作一种“液体检测”手法。

  这一期我首要介绍“液体活检”另一种手法：cfDNA。在介绍之前我先跟咱们解说几个名词：

  cfDNA（cellfree DNA），或许叫血浆游离DNA，是血浆中游离存在的DNA，它们有的来自于正常细胞，有的来自于反常细胞（如肿瘤细胞），还有部分来自于咱们外部（如病毒DNA）。

  ctDNA（circulating tumor DNA），即循环肿瘤DNA，从字面意思来讲，指的是由肿瘤细胞开释到血液循环系统中的DNA。

  cffDNA（Cell-free fetal DNA），即母体外周血提取胎儿游离DNA，经过cffDNA进行筛查，如唐氏综合征，Rh血型，性染色体反常，以及胎儿性别。

  在此顺带刺进介绍一下cffDNA，1997年，香港中文大学的卢煜明教授发现孕妈妈外周血中存在着胎儿的游离DNA，然后创始了无创产前确诊（NIPT）的新时代，无创产前基因检测现在还无法替代羊水穿刺，无创基因检测的特色，首要是弥补了一般唐筛准确性低所带来的许多无谓的羊水穿刺查看，并且弥补了许多没有办法进行羊水穿刺的孕妈妈检测唐氏儿的空白，羊水和绒毛穿刺都是一种侵入性的技能，有必定的流产危险，并不能全面推广，只能要求高龄、高危的孕妈妈检测。无创基因检测是2010年才开宣布的新技能，并且依据其检测原理与临床使用的时刻，还不能作为终究确诊规范（即便准确率有99%），羊水穿刺才干作终究确诊。

  ctDNA的发现还要早于cffDNA，早在1947年，比DNA双螺旋结构发现还早6年的时分，Mandel和Metais就发现血浆中存在游离的核酸分子；1977年，Leon等人发现，肿瘤患者的血浆游离DNA水平要显着高于健康人群；但是，又过了17年，人们才发现这种带着了骤变信息的循环DNA是肿瘤的标志。人们逐步理解，cfDNA中带着肿瘤特有骤变的那一小部分DNA，确确实实是由肿瘤细胞开释开来的，ctDNA的研讨总算与肿瘤相关起来。

  ctDNA和蛋白类符号物比较，前者的检测更活络，很少呈现假阳性，可盯梢肿瘤的消失、分散和复发。只需从受检者体内抽取外周血，依据受检者血液中是否含有某种肿瘤特异的游离DNA及数量的多少，精准的承认相应基因的骤变频率，到达前期筛查、监控、监测效果的意图。

  ctDNA是一种无细胞状况的胞外DNA，存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中，其首要是由单链或双链DNA以及单链与双链DNA的混合物组成，以DNA蛋白质复合物或游离DNA两种方式存在，血浆中ctDNA的含量很低，中位值在1%-4%之间，25%的患者挨近或低于0.1%，血浆中肿瘤DNA的复制数也较低，中位值在50-100复制/mL。因而关于ctDNA的检测活络度要求也极高。与安排活检比较ctDNA查看微创小、无放射性污染、经济、新DNA无防腐剂污染等长处，并答应对医治反响实时监测。