斑马鱼行为篇（89）：人乳腺癌斑马鱼模型

  斑马鱼被大范围的应用于发育生物学、遗传学、毒理学以及疾病建模等领域。虽然斑马鱼本身并没有与哺乳动物相同的乳腺结构，不能直接形成类似于人类的乳腺癌模型。尽管如此，斑马鱼仍旧能在癌症研究中发挥及其重要的作用。例如，能够最终靠移植人类肿瘤细胞到斑马鱼体内来创建肿瘤模型。这种方法可用于研究人类肿瘤细胞在斑马鱼体内的生长、侵袭和转移情况。通过将乳腺癌细胞系注射到斑马鱼体内，可以建立移植瘤模型。这些细胞可以在斑马鱼的特定组织或器官中形成肿瘤。斑马鱼模型能够适用于大规模的药物筛选，以鉴定对乳腺癌有效的化合物。斑马鱼模型可拿来研究乳腺癌的病理学特征，包括肿瘤的组织学类型、分化程度和肿瘤微环境。

  选取性成熟的斑马鱼按照♀∶♂=1∶3放入水中自然繁殖，收集正常胚胎放入培养池中，待胚胎发育至12 h后，在显微镜下挑去死卵，放入28 ℃孵育箱中培养。在无菌条件下将人乳腺癌MDA-MB-231细胞悬液按每毫升加入细胞染色剂氯甲基苯甲酰胺（CM-dil）7.5μL，孵育15 min后离心，弃上清液，PBS清洗后，反复2次，镜下调整细胞浓度，获得所需的细胞悬液。选取成活的2受精后天数（days postfertilization，dpf）斑马鱼胚胎，在显微镜下麻醉后将荧光标记人乳腺癌细胞微量注射至卵黄囊内，每尾约 200个细胞，然后无菌水清洗后，放入28 ℃恒温培养箱，6 h后吸去死亡斑马鱼胚胎，培养至3 dpf用于后续实验。通过荧光标记肿瘤细胞，可以在活体斑马鱼中追踪细胞的动态变化。

  斑马鱼的胚胎和幼鱼是透明的，可以直观地观察肿瘤的生长、侵袭和转移过程，无需进行侵入性操作。斑马鱼的生命周期较短，从受精到成体只需几个月，这有助于快速评估肿瘤发展和药物效果。斑马鱼的维护成本相比来说较低，且所需空间较小，适合进行大规模的遗传和药理学研究。斑马鱼的基因组易于操作，能够正常的使用CRISPR/Cas9等技术进行基因编辑，研究特定基因在乳腺癌中的作用。斑马鱼模型可用于高通量的药物筛选，以鉴定潜在的抗乳腺癌化合物。斑马鱼具有完整的免疫系统，可拿来研究肿瘤与宿主免疫系统的相互作用。

  斑马鱼与哺乳动物在生理和免疫机制上存在一定的差异，这可能会影响某些药物的疗效和肿瘤微环境的研究。斑马鱼的肿瘤可能在组织学和病理学特征上与人类乳腺癌不一样，这可能限制了模型的临床相关性。

  徐拥建,廖群标,任亚冰,等.强心利水方调控鸢尾素对阿霉素诱导的乳腺癌斑马鱼心肌损伤的影响[J].中医药导报3-1446/r.2024.06.004.

  往期实验方法，需要的老师可根据以下操作进行查阅：进入公众号脑声常谈→底部菜单栏脑声助手方法检索→最上方搜索框输入实验名称，您找的实验方法就出来啦！